FD Apop™ 试剂盒
FD Apop™ 试剂盒采用原位 DNA 缺口末端标记(TUNEL)技术¹,专用于显微镜下检测正在发生细胞凋亡的细胞。该检测方法利用末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT)催化生物素标记脱氧尿苷掺入 DNA 片段游离的 3′-羟基末端,而 DNA 片段化被认为是细胞凋亡最具特征性的标志之一²˒³。掺入的生物素随后通过亲和素-生物素复合物(ABC)法⁴进行信号放大和显色,从而实现光学显微镜下的观察与识别。
FD Apop™ 试剂盒的试剂组成及操作流程均经过优化,在检测凋亡细胞时具有较高的特异性和灵敏度,同时可有效降低背景染色。本试剂盒适用于冷冻组织切片、石蜡包埋组织切片以及培养细胞。整个检测过程约需 4 小时。
套装内容
第一部分(-20°C 保存)
消化酶 2 ml × 4
反应液 A 2 ml × 2
反应液 B 60 μl
反应液 C 40 μl
显色液 20 ml第二部分(4°C 保存)
平衡缓冲液 20 ml
检测试剂 6 ml
10× 磷酸盐缓冲盐水(PBS)250 ml × 2需另行准备的材料
- 双蒸水。
- 湿盒。
- 培养箱或恒温水浴锅(30°C)。
- 组织学实验耗材及设备,包括显微镜载玻片、盖玻片、染色缸、尖头镊子、乙醇、二甲苯或二甲苯替代品、封固剂及光学显微镜。
- 双蒸水。
参考文献
Gavrieli Y、Sherman Y 和 Ben-Sasson SA。(1992)通过核 DNA 片段化的特异性标记鉴定原位程序性细胞死亡。J. Cell Biol. 119:493-501。
Wyllie AH. (1980) 糖皮质激素诱导的胸腺细胞凋亡与内源性核酸内切酶激活有关。Nature. 284:555-6。
Arends MJ、Morris RG 和 Wyllie AH。(1990)细胞凋亡:核酸内切酶的作用。美国病理学杂志 136:593-608。
Hsu SM、Raine L 和 Fanger H. (1981) 亲和素-生物素-过氧化物酶复合物 (ABC) 在免疫过氧化物酶技术中的应用:ABC 与未标记抗体 (PAP) 程序的比较。组织化学与细胞化学杂志 29:577-80。
















