Detección de neurodegeneración: técnica de traducción de muescas in situ en el cerebro.
Este servicio incluye el seccionamiento, el etiquetado ISNT, el montaje de cubreobjetos y el etiquetado de portaobjetos. Como resultado, recibirá hasta 40 secciones etiquetadas con ISNT por cerebro o por bloque de tejido, listas para observaciones microscópicas.
Procedimiento
El tejido congelado sin fijar se cortará en un criostato y se montará en portaobjetos resistentes a las proteinasas (véase Productos, Cat. n.º PO102). Las secciones cortadas a través de diferentes niveles (o los niveles que usted elija) se procesarán en portaobjetos para la detección de neurodegeneración mediante la técnica de traslación de muescas in situ¹.
Esta técnica, descrita originalmente por Gold et al. (1993)¹, marca los núcleos de las neuronas que experimentan fragmentación del ADN. Este método se basa en la capacidad de la ADN polimerasa I para catalizar la polimerización de desoxiuridinas en los extremos de los fragmentos de ADN. Las biotinas integradas se amplifican y visualizan mediante métodos de complejos avidina-biotina².
Observaciones
- Es necesario solicitar un presupuesto antes de realizar un pedido.
- El investigador debe proporcionar tejido congelado sin fijar.
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Referencias
- Gold R., Schmied M., Rothe G., Zischler H., Breitschopf H., Wekerle H. y Lassmann H. (1993) Detección de la fragmentación del ADN en la apoptosis: aplicación de la traducción de muescas in situ a sistemas de cultivo celular y secciones de tejido. J. Histochem. Cytochem. 41: 1023-1030.
- Hsu SM, Raine L. y Fanger H. (1981) Uso del complejo avidina-biotina-peroxidasa (ABC) en técnicas de inmunoperoxidasa: una comparación entre los procedimientos ABC y de anticuerpos no marcados (PAP). J. Histochem. Cytochem. 29: 577-580.