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脑组织神经元凋亡检测——原位 DNA 缺口末端标记(TUNEL)技术

脑组织神经元凋亡检测——原位 DNA 缺口末端标记(TUNEL)技术

庫存單位: SD104

本服务包括组织切片、TUNEL 标记、盖玻片封片以及载玻片标识。完成后,您将获得每个脑组织或每个组织块 最多 40 张 已完成 TUNEL 标记的组织切片,可直接用于显微镜观察。.

  • 实验步骤

    未经固定的冷冻组织将采用冷冻切片机(Cryostat)进行切片,并贴附于耐蛋白酶显微镜载玻片上(参见产品目录,货号:PO102)。可根据您的需求选择不同切面位置进行切片,随后在载玻片上进行处理,采用**原位 DNA 缺口末端标记法(In Situ DNA Nick End-Labeling,TUNEL)**¹检测发生细胞凋亡的神经元。

    该技术最初由 Gavrieli 等人(1992)¹ 提出,可对发生 DNA 断裂的神经元细胞核进行特异性标记。其原理是利用末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT)催化生物素标记脱氧尿苷掺入 DNA 片段游离 3′-羟基末端。DNA 断裂被认为是细胞凋亡最具代表性的特征之一²˒³。掺入的生物素随后通过亲和素-生物素复合物(ABC)法⁴进行扩增和显色(见产品示例图片)。

  • 备注

    • 订购前请先申请报价。
    • 研究人员需提供未经固定的冷冻组织。
    • 如需了解更多信息,请联系我们。
  • 参考文献

    1. Gavrieli Y, Sherman Y, and Ben-Sasson SA: Identification of programmed cell death in situ via specific labeling of nuclear DNA fragmentation. J. Cell Biol. 119: 493-501, 1992.
    2. Wyllie A. H. (1980) Glucocorticoid-induced thymocyte apoptosis is associated with endogenous endonuclease activation. Nature 284: 555-556.
    3. Arends M. J., Morris R. G. and Wyllie A. H. (1990) Apoptosis: the role of the endonuclease. Amer. J. Pathol. 136: 593-608.
    4. Hsu S. M., Raine L. and Fanger H. (1981) Use of avidin-biotin-peroxidase complex (ABC) in immunoperoxidase techniques: a comparison between ABC and unlabeled antibody (PAP) procedures. J. Histochem. Cytochem. 29: 577-580.
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